Mikroskopická sklíčka se používají ke zkoumání jednobuněčných organismů a detailnímu pohledu na malé rostliny a organismy. Existují dva typy připravených skluzavek: suché a mokré. Každý typ metody přípravy se používá k montáži různých typů článků. Pokud montujete za mokra obzvláště bledý nebo průsvitný vzorek, možná budete muset vzorek obarvit, aby byl viditelný pod mikroskopem.
Kroky
Metoda 1 ze 3: Příprava suché montáže
Krok 1. Vyberte čistý snímek
Podržte sklíčko směrem ke zdroji světla a podívejte se skrz, abyste se ujistili, že neobsahuje šmouhy a špínu. Většina mikroskopických sklíček je plochá nahoře a dole a má obdélníkový tvar. Jsou čiré a umožňují průchod světla z mikroskopu a osvětlení průsvitného vzorku. Pokud je vaše sklíčko špinavé nebo rozmazané, nebudete moci svůj vzorek účinně prozkoumat.
Pokud zjistíte, že je na vašem mikroskopickém sklíčku nějaká kontaminace-včetně vašich vlastních otisků prstů-rychle ho omyjte tekutým mýdlem a vodou. Sklíčko osušte čistým hadříkem. Nepoužívejte papírové kapesníky nebo utěrky, protože mohou zanechat vlákna
Krok 2. Prohlédněte vzorek, abyste zjistili, zda je třeba jej krájet
Vzorek vzorku musí být průsvitný (nebo poloprůhledný) až průhledný, aby prošlo světlo. Pokud světlo nemůže zcela projít vzorkem a do okuláru mikroskopu, nebudete moci preparát mikroskopem vidět.
Některé vzorky (např. Pramen vlasů nebo křídlo hmyzu) jsou samy o sobě tenké a průsvitné a nemusí být krájeny žiletkou
Krok 3. Odřízněte tenký kousek vzorku
Pomocí žiletky nakrájejte materiál vzorku na tenký, průsvitný plátek. Suché držáky se připravují nejjednodušeji, protože mezi sklíčkem a vzorkem nepoužívají žádnou kapalinu. Suchý držák je ideální pro kontrolu vzorků, u kterých nehrozí vyschnutí. Mezi materiály, které se běžně montují nasucho, patří:
- Korkové nebo balzové dřevo.
- Okvětní lístky nebo listy.
- Hmyzí nohy nebo křídla.
- Vlasy, srst nebo peří.
Krok 4. Umístěte vzorek na podložní sklíčko
Pomocí kleští seberte tenký plátek vzorku. Jemně ho položte na jednu stranu skluzavky. Pokud používáte konkávní sklíčko (ve kterém jedna strana klesá dolů), umístěte vzorek do středu konkávní oblasti.
- Namontujte vzorek na konkávní podložní sklíčko, pokud máte obavy, že se vzorek odvalí nebo sklouzne z plochého sklíčka. Například konkávní sklíčko použijte, pokud připravujete stočený okvětní lístek, který se stočí na jednu nebo druhou stranu.
- U všech ostatních typů vzorků bude fungovat plochý sklíčko.
Krok 5. Umístěte krycí sklíčko na vzorek vzorku
Krycí sklíčko brání tomu, aby se vzorek vzorku sesunul ze sklíčka. Skluz také ochrání vzorek vzorku v případě, že jeden z uživatelů mikroskopu omylem sníží čočku natolik, že poklepá na vzorek.
- Krycí sklíčka jsou velmi tenké, průhledné kusy skla nebo, běžněji, z plastu. Každý skluz je o 3⁄4 1,9 cm na šířku i na délku.
- Vaše připravené sklíčko je nyní připraveno ke kontrole pod mikroskopem.
Metoda 2 ze 3: Příprava mokré montáže
Krok 1. Umístěte 1 kapku vody na podložní sklíčko
Pomocí kapátka kapejte 1 kapku vody na přesný střed plochého nebo konkávního sklíčka. Tato vodní kapka dává mokrému horu jméno. Kapalina udržuje vzorek vzorku vlhký a zabraňuje vysoušení a deformaci vlhkého organického vzorku. Voda také uchovává živé exempláře, jako jsou jednobuněčné organismy.
Pokud chcete vytvořit trvalý snímek z mrtvého organického materiálu, můžete místo kapky vody použít tenkou vrstvu čirého laku na nehty
Krok 2. Oškrábejte nebo nakrájejte část mokrého vzorku
Vzorky vzorků používané pro mokré držáky jsou obvykle mokrý nebo živý organický materiál. Pomocí žiletky nebo párátka seřízněte nebo oškrábejte malé množství mokrého vzorku. Mezi materiály běžně používané k výrobě diapozitivů za mokra patří:
- Lícní buňky nebo zubní plak (vyškrábaný z úst párátkem).
- Tenký průřez stonku rostliny (řezaný žiletkou).
- Pokud studujete jednobuněčné organismy-např. Pinzeta na amébu nebo paramecium udělá málo dobrého. Místo toho pomocí čistého kapátka nasajte pár kapek vody, ve které jednobuněčné organismy nebo řasy plavou.
Krok 3. Umístěte vzorek do kapky vody
V závislosti na typu materiálu, který používáte jako vzorek, použijte k přenosu vzorku na sklíčko kleště, pinzetu nebo párátko. Umístěte vzorek doprostřed kapičky vody tak, aby byl zavěšen v kapalině.
Pokud používáte kapátko ke sběru jednobuněčných organismů, vložte 1 nebo 2 kapky do kapky vody již na sklíčku
Krok 4. Na mokrý vzorek položte krycí sklíčko
Krycí sklíčko držte pod úhlem 45 °. Nastavte jeden z okrajů dolů těsně vedle vzorku na kapce vody. Potom sklopte druhou stranu sklíčka, dokud nebude nahoře na vzorku. Měli byste vidět kapky vody rozprostřené pod krycím sklíčkem, dokud nedosáhnou jeho okrajů.
Jakmile je krycí sklíčko na svém místě, neklepejte na něj a netlačte na něj. Pokud tak učiníte, riskujete vytlačení vzorku a vody ze sklíčka
Metoda 3 ze 3: Barvení buněčných vzorků
Krok 1. Umístěte list papírového ručníku na jeden okraj krycího sklíčka
Umístěte ručník na okraj skluzu, aniž byste narušili materiál pod krycím skluzem. Absorpční papírový ručník vytáhne část vody zpod krycího sklíčka a vytáhne barvicí činidlo pod krycí sklíčko a na vzorek.
- Pokud je váš preparát nasazený na mokru bledý nebo bezbarvý (např. Průřez bezbarvého stonku rostliny), může být při pohledu mikroskopem špatně vidět. Barvení vzorku vám umožní lépe vidět jeho tvar a strukturu.
- To se obvykle provádí poté, co jste mokrý vzorek již prohlédli na sklíčku, aniž byste jej obarvili. Sklíčko může být již připraveno, i když není obarveno.
Krok 2. Na druhou stranu krycího sklíčka položte 1 kapku jodové nebo methylenové modři
Použijte kapátko a nakapejte barvicí chemikálii na podložní sklíčko mikroskopu, přímo vedle krycího sklíčka. Dávejte pozor, abyste vydali pouze 1 kapku. Ze sklíčka může vytéct přebytečné barvicí činidlo.
- Jodovou nebo methylenovou modř lze zakoupit v jakémkoli vzdělávacím obchodě nebo v obchodě s biologickými potřebami.
- Alternativním způsobem, jak toho dosáhnout, je přidat kapku barvicího činidla do vody na vlhké podložní sklíčko, když jej poprvé připravujete. V tomto případě nepotřebujete papírový ručník.
Krok 3. Počkejte, až se barvicí prostředek natáhne pod kryt sklíčka
Barvící prostředek začne prosakovat pod krycí sklíčko, protože papírový ručník nasává vodu z druhé strany. Může trvat až 5 minut, než se jodová nebo methylenová modř zcela vsákne pod kryt sklíčka a nasytí vzorek.
Jakmile jodová nebo methylenová modř zatáhne úplně pod kryt sklíčka, vzorek se zcela vybarví
Krok 4. Přebytečný barvicí prostředek otřete čistou papírovou utěrkou
Očistěte povrch podložního sklíčka, aby ze strany nevytekly žádné volné kapaliny. Vaše mokré diapozitivy jsou nyní obarveny a připraveny k pozorování pod mikroskopem.
